Uji Kualitatif Kolesterol

I.                    Judul Praktikum        : Uji Kualitatif Kolesterol (Steroid)

II.                  Tanggal Praktikum   : Jum’at, 16 Mei 2014

III.                Tanggal Laporan       : Jum’at, 23 Mei 2014

IV.                Identitas Sample     

a.       Nama Sample    : sample minyak bimoli

b.      Warna sample   : kuning

c.       Bentuk sample  : cair

V.                  Tujuan Praktikum    :

Mengetahui ada atau tidaknya sterol dalam sample

VI.                Prinsip Percobaan    :

a. Uji Salkowski

Sejumlah tertentu sampel dilarutkan dalam CHCl₃ anhidrous, lalu direaksikan dengan H₂SO₄ pekat sehingga terbentuk lapisan warna hasil reaksi antara kolesterol dengan H₂SO₄, lalu dibandingkan dengan satndar kolesterol.

b. Uji Lieberman – Burchard

Sejumlah tertentu sampel dilarutkan dalam CHCl₃ anhidrous, lalu direaksikan dengan anhidrida asam asetat dan H₂SO₄ pekat sehingga terbentuk senyawa berwarna coklat, lalu diandingkan dengan standar kolesterol.

VII.              Dasar Teori                 :

Kolesterol adalah salah satu steroid yang penting dan terdapat banyak dialam. Dari rumus kolesterol dapat dilihat bahwa gugus hidroksil yang terdapat pada atom C nomer 3 mempunyai posisi beta oleh karena itu dihubungkan oleh garis penuh. Kolesterol dan lipid lainnya diangkut dalam darah.

Uji salkowski erupakan uji kualitatif yang dilakukan untuk mengidentifikasi keberadaan kolesterol-kolesterol yang dilarutkan dalam kloroform anhidrat dengan volume yang sama ditambahkan H₂SO₄ yang berfungsi memutuskan ikatan ester lipid, apabila didalam sample tersebut terdapat kolesterolmaka bagian menjadi berwarna merah menandakan adanya kolesterol dan H₂SO₄ menjadi warna kuning dengan warna hijau.

Uji Lieberman-Burchard merupakan uji kualitatif kolesterol yang prinsipnya adalah mengidentifikasi kolesterol dengan penambahan H₂SO₄ kedalam campuran. Mekanisme yang terjadi dalam uji ini adalah ketika H₂SO₄ ditambahkan maka molekul air dari gugus kolesterol akan berpindah. Kolesterol kemudian teroksidasi membentuk 3,5 kolesteroldiena. Produk ini dikonversi menjadi polimer yang mengandung kromofor          yang menghasilkan warna hijau.

VIII.            Alat dan Bahan          :

Alat        :

1.       Tabung reaksi

2.       Gelas kimia 100 ml

3.       Pipet tetes

4.       Pipet ukur 10 ml

Bahan   :

1.       Sample minyak

2.       CHCl₃ anhidrat

3.       Alkohol 98%

4.       Standar kolesterol

5.       Asam asetat glasial

6.       H₂SO₄ pekat

IX.                Langkah Kerja            :

a. Uji Salkowski

1. Larutkan 5-10 mg kolesterol dan sampel dengan 3 mL kloroform anhidrous di dalam tabung reaksi.

2. Tambahkan secara hati-hati, 3 mL H₂SO₄ pekat ke dalam masing-masing tabung, lalu kocok. Amati warna yang terbentuk.

b. Uji Lieberman – Burchard

1. Larutkan 5-10 mg kolesterol dan sampel dengan 3 mL kloroform anhidrous di dalam tabung reaksi.

2. Tambahkan 10 tetes anhidrida asam asetat dan 2 tetes H₂SO₄ pekat ke dalam masing-masing tabung, lalu kocok dan diamkan. Amati warna yang terbentuk.

X.                  Data Pengamatan    :

Pengamatan	Blanko	Sample Minyak Bimoli	Standar kolesterol	Kesimpulan
Kondisi awal	Bening	Kuning	Kuning	Dapat disimpulkan bahwa sample tidak mengandung kolesterol
Uji Salkowski	Bening	Berwarna coklat	Coklat kemerahan
Uji Lieberman-Burchard	Berwarna hitam dan ungu di tengah	Merah	Hijau

XI.                Pembahasan              :

1.       Fungsi CHCl3 adalah sebagai pelarut sample minyak, karena minyak larut dalam pelarut yang nonpolar

2.       Hasil positif uji Lieberman-Burcahrd yang berwarna merah diakibatkan terbentuknya asam 3-aseto-5-kolesterolsulfonat

XII.              Kesimpulan                :

Dari hasil praktikum uji kualitatif kolesterol pada minyak bimoli bahwa sample tak mengandung kolesterol

XIII.            Daftar Pustaka          :